柱前衍生與柱后衍生不同之處的比較:
1.柱前衍生:分析物通過色譜柱之前,先與衍生劑反應,反應產物在色譜柱上分離。實際分離出來的是衍生產物,檢測出來的也是衍生產物。其優點在于反應條件的選擇相對自由;衍生副產物可以進行預處理;可供選擇的衍生品更多;對反應動力學沒有限制;易于進行多步反應,不需要復雜的儀器和設備。
2.柱后衍生:分析物在色譜柱中分離后,與衍生池中的衍生劑反應,檢測衍生產物。它的優點是重現性好,影響因素少,引入物質少,被分析物可按原樣分離,易于選擇現有的分析方法。
柱后衍生法首先將多組分樣品注入色譜柱,根據選擇的色譜條件在色譜柱I中進行分離。各組分流出色譜柱后,在一定的反應條件下與衍生化試劑反應,衍生化產物由人體檢測器檢測。常用的衍生方法包括紫外衍生、熒光衍生、電化學衍生和手性衍生。在柱后衍生過程中,要注意流動相和反應介質組成的一致性,衍生試劑和反應產物的溶解性,以及它們與流動相之間可能發生的副反應。同時要求待測組分從色譜柱到檢測器之間的體積要很小,以盡量減小組分色譜帶增寬對分離的影響。